ELISA
Mikroplokštelinė EUROIMMUN ELISA
Tyrimo principas
- Polistireno mikroplokštelės juostelės, padengtos išgrynintais, biochemiškai apibūdintais antigenais yra naudojamos kaip kieta, antigenais padengta fazė. Jeigu mėginys yra teigiamas, praskiestame serumo mėginyje esantys specifiniai antikūnai rišis su antigenais, esančiais kietos fazės paviršiuje.
- Antrojo etapo metu susirišę antikūnai nustatomi naudojant peroksidaze žymėtus anti-žmogaus antikūnus.
- Trečiojo etapo metu susirišę antikūnai nustatomi/išryškinami naudojant chromogeno-substrato tirpalą, kuris gali sukelti spalvinę reakciją. Spalvos intensyvumas yra proporcingas serumo mėginyje esančių antikūnų koncentracijai.
- Monospecifinė ELISA (imunofermentinė analizė, kurios metu naudojamas vienas antigenas) – tai kiekybinis, antikūnų nustatymui skirtas tyrimas in vitro. “Profile ELISA” - tai pusiau kiekybinis in vitro tyrimas, įgalinantis nustatyti skirtingus antikūnus vienoje mikroplokštelės juostelėje.
- ‘Pool ELISA’ atveju kieta fazė yra padengta antigenų mišiniu, kuris naudojamas pusiau kiekybiniam antikūnų nustatymui. Vėliau šių antikūnų specifiškumas toliau tiriamas atliekant monospecifinius tyrimus.